Readable documentation excerpt. Open the original PDF for all tables, figures and complete instructions.
Page 1
ΒΕΛΤΙΩΜΕΝΗ ΜΕΘΟΔΟΣ ΓΙΑ ΕΙΣΑΓΩΓΗ
ΤΗΝ ΟΜΟΓΕΝΕΪΣΗ ΤΗΣ ΒΙΟΨΙΑΣ
Οι μικροβιακές λοιμώξεις στις προσθετικές αρθρώσεις (PJI)
παρουσιάζουν σημαντικές διαγνωστικές προκλήσεις. Η παρούσα
μελέτη διερευνά δύο τεχνικές ομογενοποίησης σε συνδυασμό με
ισοθερμική μικροθερμιδομετρία (IMC) για την ανίχνευση
ΚΑΙ ΤΗΝ ΓΡΗΓΟΡΗ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ μικροβιακών λοιμώξεων.
ΣΤΟΧΟΣ
ΛΟΙΜΩΞΕΩΝ • • Αξιολόγηση της επίδρασης της τεχνικής ομογενοποίησης
στο ποσοστό ανάκτησης και στην ταχύτητα ανίχνευσης,
ανάλογα με τις τεχνικές ομογενοποίησης σε συνδυασμό με την
ανάγνωση IMC.
JOSEFIN LARSSON1,2, KARIN LIDEROT3, MARTA VESES GARCIA1,
Page 1
ανάγνωση IMC.
JOSEFIN LARSSON1,2, KARIN LIDEROT3, MARTA VESES GARCIA1, •
CHAITANYA TELLAPRAGADA2, WILHELM PAULANDER1, CHRISTIAN GISKE2 • Να αξιολογηθεί το δυναμικό αυτών των μεθόδων σε μια
1 Symcel AB, Stockholm, Sweden
κλινική ροή εργασίας, σε σύγκριση με τις τυπικές τεχνικές των
2 Karolinska Institute, Sweden νοσοκομείων.
3 Karolinska University Hospital
ΜΕΘΟΔΟΙ
1 ΠΕΙΡΑΜΑ IN VITRO 2 ΠΕΙΡΑΜΑ IN VIVO
Τυποποιημένες
Ομογενοποίηση μέθοδοι
με βάση σφαιρίδια μικροβιολογίας
όγκος 100-500ul
ταχεία ανίχνευση λοίμωξης και
εκτίμηση βακτηριακού φορτίου
Ομογενοποίηση με βάση IMC και επιμετάλλωση
Page 1
Ομογενοποίηση με βάση IMC και επιμετάλλωση
σφαιρίδια/άλεση με πέτρες
Alternative Method
ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ
ΣΥΓΚΡΙΣΗ ΤΗΣ ΕΠΙΔΡΑΣΗΣ ΣΤΟ ΧΡΟΝΟ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗΣ ΚΑΙ ΤΗΝ ΕΦΑΡΜΟΓΗ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑΣ ΜΑΣ ( ΟΜΟΓΕΝΟΠΟΙΗΣΗ +
ΑΝΑΚΤΗΣΗ ΜΙΚΡΟΒΙΩΝ ΤΗΣ ΤΕΧΝΙΚΗΣ ΟΜΟΓΕΝΕΙΑΣΗΣ ΑΝΑΓΝΩΣΗ IMC) ΣΕ ΚΛΙΝΙΚΑ ΔΕΙΓΜΑΤΑ ΣΕ ΣΥΓΚΡΙΣΗ ΜΕ ΤΗΝ
ΑΜΕΣΑ ΣΕ ΥΓΡΕΣ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ S. aureus ΤΥΠΙΚΗ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ
50% ταχύτερη ανίχνευση του S. aureus (<2 ώρες) μετά από 5 φορές υψηλότερη μικροβιακή ανάκτηση με τη χρήση 48 δείγματα από 22 ασθενείς με PJI. Συγκρίθηκαν δύο μέθοδοι
εναλλακτικών μεθόδων ομογενοποίησης (διάστημα 2 λεπτών) σε ομογενοποίησης με ανάγνωση βάσει IMC και η τυπική μέθοδος του
Rapid detection
ομογενοποίηση με of S.aureus
εναλλακτική μέθοδο ομογενοποίησης
ομογενοποίηση με εναλλακτική ομογενοποίηση. σύγκριση με την τυπική μέθοδο ομογενοποίησης. νοσοκομείου.
infection directly on homogenate
Metabolic 150 Recovery (%) alternative homogeniser
activity alternative homogeniser standard homogeniser
(uW) (hospital)
Heat flow (µW)
100 hospital homogeniser
Το μεγαλύτερο μέρος του δείγματος
Page 1
Το μεγαλύτερο μέρος του δείγματος
προορίζεται για τη ροή εργασίας του
50 Time to νοσοκομείου, αφήνοντας λιγότερο υλικό
Detection βιοψίας για τη ροή εργασίας που εξετάζεται.
Αυτό δημιουργεί μεροληψία, η οποία
0 ενδέχεται να οδηγήσει σε ψευδώς αρνητικά
Time (h) 4 6 8 10 αποτελέσματα.*
Homogenisation interval
Time (h)
ΑΝΑΚΤΗΣΗ ΤΟΥ ΕΥΑΙΣΘΗΤΟΥ ΣΤΟ ΟΞΥΓΟΝΟ C. acnes ΑΠΟ
ΕΝΙΣΧΥΜΕΝΟ ΙΣΤΟ ΧΟΙΡΙΝΟΥ ΚΡΕΑΤΟΣ ΜΕΤΑ ΑΠΟ ΟΜΟΓΕΝΟΠΟΙΗΣΗ Σε δύο πολυμικροβιακά δείγματα, η τυπική
ομογενοποίηση + IMC δεν ανίχνευσε το S.
Page 1
ομογενοποίηση + IMC δεν ανίχνευσε το S.
aureus ή το σύμπλεγμα E. cloacae, αντίστοιχα.
2 έως 2,5 φορές υψηλότερη Σε τρία πολυμικροβιακά
ανάκτηση C. acnes (6,15 έως δείγματα, τα E. faecalis
7,6*104 κύτταρα) ανάλογα με το και C. acnes δεν
διάστημα ομογενοποίησης με ανιχνεύθηκαν κατά τη
εναλλακτική μέθοδο σε σύγκριση διάρκεια της τυπικής
με την τυπική μέθοδο στις
κλινικές (2,75 – 3,3*104
ροής εργασίας.
ΤΙ ΕΙΝΑΙ
κύτταρα).
ΕΠΟΜΕΝΟ
% των κυττάρων 105 C.
Page 1
ΕΠΟΜΕΝΟ
% των κυττάρων 105 C. acnes που
χρησιμοποιήθηκαν για τη μόλυνση του ιστού.
*Τέσσερα δείγματα (δεν εμφανίζονται) της διαδικασίας ομογενοποίησης+IMC ήταν ψευδώς
αρνητικά σε σύγκριση με τη διαδικασία του νοσοκομείου, κάτι που μπορεί να εξηγηθεί με τη ; μελέτη,
Σε μια εν εξελίξει
χρήση λιγότερου υλικού βιοψίας.
επεκτείνουμε την ομάδα
μελέτης σε 120 ασθενείς με
PJI, επιτρέποντας τον
προσδιορισμό της
ταχύτητας ανίχνευσης της
ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑ
Page 1
ταχύτητας ανίχνευσης της
ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑ ΣΗΜΑΝΤΙΚΟΤΗΤΑ λοίμωξης με τη χρήση IMC.
Η εναλλακτική μέθοδος ομογενοποίησης (SpinAX/ProbeAX Evolution, Μια ημιαυτόματη ροή εργασίας που συνδυάζει μια βελτιωμένη τεχνική
Axonlab AG, Γερμανία) αποδεικνύεται λιγότερο επιβλαβής για τα βακτήρια ομογενοποίησης, για υψηλότερα ποσοστά ανάκτησης και ταχύτητα σε
σε σύγκριση με την τυπική μέθοδο ομογενοποίησης (Bullet Blender 50DX. συνδυασμό με μια ευαίσθητη ανάγνωση βασισμένη σε IMC, είναι πολλά
Next Advance, ΗΠΑ), επιτρέποντας ταχύτερη και υψηλότερη ανάκτηση, υποσχόμενη ως μια λιγότερο επεμβατική και πιο αποτελεσματική
αυξάνοντας τελικά την ακρίβεια και την ταχύτητα. εναλλακτική λύση σε σχέση με το τρέχον κλινικό πρότυπο.
Η χρήση του IMC για ημιαυτόματη ανάγνωση παρέχει ανίχνευση
μικροβίων σε λίγες ώρες, σε σύγκριση με τις ημέρες που απαιτούνται με τις
τυπικές μεθόδους μικροβιολογίας. With funding from:
CONTACT
Η αυξημένη ανίχνευση ευαίσθητων C. acnes με την εναλλακτική μέθοδο
ομογενοποίησης είναι πολλά υποσχόμενη. Απαιτείται επιβεβαίωση αυτών
των ευρημάτων σε μια μεγαλύτερη ομάδα μελέτης.
wilhelm.paulander@symcel.com