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P-024 Evaluation de trois flacons prêts à l’emploi
pour le broyage des prélèvements orthopédiques
Olivier Dauwalder , Camille Kolenda , Cécile Eymard , Marine Jawhar , Cécile Batailler ,
1 1 1 1 2
Christophe Gaillard 2, Frédéric Laurent 1, Céline Dupieux 1.
1 Service de Bactériologie, Institut des Agents Infectieux, Hospices Civils de Lyon, Lyon, France
2 Services de Chirurgie orthopédique, Hospices Civils de Lyon, Lyon France
Contact : celine.dupieux@chu-lyon.fr ; 04 72 07 11 11
Introduction Objectif
La culture conventionnelle est essentielle dans le diagnostic microbiologique
L’objectif de cette étude était de comparer les
des infections ostéoarticulaires (IOA) pour obtenir l’antibiogramme des bactéries
incriminées. Un broyage des prélèvements solides est indispensable avant leur performances analytiques de 2 nouveaux flacons commerciaux pour
ensemencement afin d’optimiser la sensibilité mais la méthode utilisée doit le broyage des prélèvements osseux :
limiter les contaminations. Un des moyens est d’utiliser des supports de ProbeAx Evolution (Axonlab)
prélèvements permettant un broyage direct au laboratoire sans avoir à ouvrir et et TISSUtainer (Diagante),
à manipuler le prélèvement. Plusieurs flacons prêts à l’emploi sont actuellement au flacon Ultra-Turrax® UTX-001 (Labelians).
disponibles.
Méthodes
▪ Patients : étude prospective ayant inclus 15 patients à forte suspicion d’IOA
▪ Méthodes :
- Au bloc opératoire, prélèvements diagnostiques du soin courant (SC) réalisés en flacons
UTx. Pour l’étude, réalisation en triple de 2 biopsies osseuses parmi les 3 à 7 du SC afin de les
Ultra-Turrax® UTX-001 TISSUtainer ProbeAx Evolution introduire aussi en flacons PAx et TIt
(UTx ; Labelians) (TIt ; Diagante) (PAx ; Axonlab)
Milieu de Eau stérile qualité BM Milieu de conservation Solution saline qualité BM
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en flacons PAx et TIt
(UTx ; Labelians) (TIt ; Diagante) (PAx ; Axonlab)
Milieu de Eau stérile qualité BM Milieu de conservation Solution saline qualité BM
- Transport ± conservation préanalytique à +4°C, puis broyage selon instructions du fabricant
broyage 2 mL qualité BM, 10 mL 5 mL - Ensemencement et incubation des broyats selon les recommandations du REMIC
Méthode de
Billes acier x10 Billes acier x4
Bloc céramique + râpe - Lecture des cultures : quantification / identification des colonies obtenues puis classement
broyage métallique Inox
en espèce responsable d’IOA ou contaminant selon les définitions REMIC
Broyeur Ultra-Turrax® (IKA) MM400 (Retsch®) SpinAX (AxonLab A.G.)
Temps de
▪ Interprétation : - Référence = résultats globaux du SC (en UTx ; 3 à 7 biopsies/patient)
1 min / 1 échantillon 2,5 min / 2-8 échantillons 1 min / 1 échantillon
broyage - Comparaison des espèces bactériennes retrouvées avec chaque poudrier
- Comparaison semi-quantitative du nombre de colonies obtenues
Résultats
▪ Résultats des 3 à 7 flacons UTx du SC pour les 15 patients inclus : ▪ Comparaison des résultats obtenus par les 3 types de flacons pour le broyage
aucun microorganisme en culture pour 3 patients des prélèvements orthopédiques des 15 patients inclus :
12 IOA (7 monomicrobiennes et 5 polymicrobiennes) Résultats SC Résultats pour les 2 biopsies incluses dans l’étude (réalisées en triple)
(3 à 7 UTx) En UTx En PAx En TIt
▪ Bactéries et nombre de prélèvements du SC positifs pour les 12 infections :
3 patients avec
Patient n° 3 Finegoldia magna 4/5 stériles stériles stériles
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Patient n° 3 Finegoldia magna 4/5 stériles stériles stériles
prélèvements stériles
4 Staphylococcus aureus 5/5
7 Pseudomonas aeruginosa 5/5 7 IOA - 6 (86%) détectées par ≥ 1 des prélèvements inclus pour chacun des poudriers
9 Cutibacterium acnes 5/5 monomicrobiennes - 1 non détectée
10 Staphylococcus aureus 4/4 5 IOA
5/5 détectées 5/5 détectées 5/5 détectées
13 Cutibacterium acnes 2/5 polymicrobiennes
(14 espèces, 87,5%) (11 espèces, 69%) (12 espèces, 75%)
15 Cutibacterium acnes 5/5 (16 espèces au total)
1 Escherichia coli 5/7, Staphylococcus aureus 1/7 Espèces additionnelles : Espèces additionnelles :
6 Enterobacter cloacae 5/5, Enterococcus faecium 5/5 - contaminations : 3 - contaminations : 2
8 Pasteurella canis 2/3, Fusobacterium spp 2/3, Parvimonas micra 1/3
(staphylocoques non-aureus) (C. acnes, Kocuria)
- pathogènes : 5 - pathogènes : 3
11 Proteus mirabilis 5/5, Staphylococcus aureus 1/5
(C. striatum, Neisseria spp, (C. striatum, Neisseria spp,
12 Escherichia coli 5/5, Staphylococcus aureus 5/5, Enterococcus casseliflavus 4/5,
P. mirabilis, S. epidermidis, S. epidermidis)
Acinetobacter nosocomialis 5/5, Lysinibacillus fusiformis 2/5, Bacillus thuringiensis 5/5,
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P. mirabilis, S. epidermidis, S. epidermidis)
Acinetobacter nosocomialis 5/5, Lysinibacillus fusiformis 2/5, Bacillus thuringiensis 5/5,
S. constellatus)
Streptococcus mitis/oralis 4/5
→ Au final, les nouveaux flacons donnaient des résultats strictement concordants ou avec plus d’espèces détectées que les UTx du SC dans 76,7% pour les PAx
comme les TIt. Le nombre de colonies obtenues en culture n’était pas significativement différent malgré un volume de broyage différent La conservation
préanalytique à +4°C jusqu’à 3j des flacons PAx et TIt n’a pas empêché de détecter des espèces exigeantes (Pasteurella, Neisseria, anaérobies).
Conclusion
Cette étude prospective, bien que limitée en nombre de patients, montre des performances analytiques équivalentes entre les 2 flacons
ProbeAx Evolution et TISSUtainer, semblant supérieures au SC utilisé dans nos services (Ultra-Turrax®). Des études prospectives plus larges sont
nécessaires pour confirmer ces résultats. Des critères de praticabilité doivent aussi être considérés dans le choix de ces flacons : sachet et support
du flacon, résistance aux chocs (pneumatique), bruit (UTx > TIt > PAx), encombrement (TIt > UTx et PAx), nombre d’échantillons traités en même
temps (TIt > Utx et PAx) ou volume de broyat disponible (TIt > PAx > UTx).