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Comm orale DUPIEUX congrès CRIOAc 2025 v2

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Performances de trois flacons prêts à l’emploi pour le broyage des prélèvements orthopédiques Olivier Dauwalder1, Camille Kolenda1, Cécile Eymard1, Marine Jawhar1, Cécile Batailler2, Christophe Gaillard2, Frédéric Laurent1, Céline Dupieux1 1 Bactériologie, Hospices Civils de Lyon, France 2 Chirurgie orthopédique, Hospices Civils de Lyon, France Céline DUPIEUX Service de Bactériologie - Institut des Agents Infectieux - Hôpital de la Croix Rousse Centre de Référence des Infections Ostéo-Articulaires Complexes Rhône-Alpes celine.dupieux@chu-lyon.fr

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INTRODUCTION ▪ Diagnostic des IOA par culture essentiel (antibiogramme) ▪ Broyage des prélèvements solides nécessaire avant ensemencement ▪ Objectif : optimiser la sensibilité / limiter les contaminations ▪ Moyen : supports de prélèvements permettant un broyage directement sans manipulation du prélèvement ▪ OBJECTIF = comparer les performances analytiques de 2 nouveaux flacons prêts à l’emploi • ProbeAx Evolution (PAx ; Axonlab A.G.) • TISSUtainer (TIt ; Diagante) au flacon Ultra-Turrax® UTX-001 (UTx ; Labelians)

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SUPPORTS EVALUES Ultra-Turrax® UTX-001 TISSUtainer ProbeAx Evolution (UTx ; Labelians) (TIt ; Diagante) (PAx ; Axonlab) Milieu de broyage Eau stérile qualité BM Milieu de conservation qualité Solution saline qualité BM 2 mL BM, 10 mL 5 mL Méthode de broyage Bloc céramique + râpe Billes acier x10 Billes acier x4 métallique Inox Broyeur Ultra-Turrax® (IKA) MM400 (Retsch®) SpinAX (AxonLab A.G.) Temps de broyage 1 min / 1 échantillon 2,5 min / 2-8 échantillons 1 min / 1 échantillon Marquage CE (ancienne réglementation DM-DIV classe A stérile, DM-DIV classe A stérile, 98/79/CE) CE IVDR CE IVDR

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MATERIEL ET METHODES ▪ Etude prospective ▪ 2 blocs de chirurgie orthopédique des Hospices Civils de Lyon (HCL) ▪ 15 patients à forte suspicion d’IOA • Prélèvements diagnostiques réalisés pour le soin courant (SC) en flacons Ultra-Turrax • Parmi ces prélèvements, 2 réalisés en triple et introduits au bloc dans les 3 flacons • Au laboratoire : - Flacons Ultra-Turrax traités selon le flux du SC - Flacons ProbeAx et TISSUtainer traités pour l’étude selon disponibilité des techniciens référents (conservation préanalytique à +4°C en cas d’attente ; 1-3 jours) - Broyats analysés selon les recommandations du REMIC (géloses COS, PVX, SCS et bouillon Schaedler, incubés 14 j)

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INTERPRETATION DES RESULTATS ▪ Lecture des cultures : quantification / identification des colonies obtenues ▪ Définitions : • Espèce responsable d'IOA : si retrouvée ≥ 2 fois sur pvts du SC ou de l’étude pour les bactéries potentiellement contaminantes et ≥ 1 fois pour les bactéries non classiquement contaminantes • Contamination si 1 seul pvt positif avec une espèce peu virulente des flores ou de l’environnement ▪ Comparaison : • Nombre d’espèces bactériennes retrouvées avec chaque poudrier • Référence : résultats globaux des pvts en Ultra-Turrax du SC • Pour chaque espèce retrouvée par ≥ 2 types de poudriers, comparaison semi-quantitative du nombre de colonies obtenues (catégories > 50 UFC, 26-50, 11-25, 6-10, 1-5, uniquement bouillon)

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RESULTATS ▪ Les 3 à 7 flacons UTx réalisés pour le SC des 15 patients ont retrouvé • 7 infections monomicrobiennes • 5 infections polymicrobiennes • aucun microorganisme pour 3 patients

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RESULTATS ▪ Pour les 3 patients avec prélèvements stériles Patient Ultra-Turrax SC TISSUTainer ProbeAx Evo 2 2/2 stériles 2/2 stériles 2/2 stériles 5 2/2 stériles 2/2 stériles 2/2 stériles 1/2 stérile 14 2/2 stériles 2/2 stériles et 1/2 contaminé * * 1 colonie Cutibacterium acnes sur SCS14

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RESULTATS ▪ Pour les 7 infections monomicrobiennes : détectées dans 6 cas sur 7 (86%) dans au moins 1 des 2 prélèvements de l’étude, ceci par tous les flacons comparés (UTx, PAx, TIt) Pvts SC Ultra-Turrax Espèces en plus dans Patient Microorganisme TISSUTainer ProbeAx globaux SC l’étude 3 Finegoldia magna 4/5 1/2 1/2 2/2 4 Staphylococcus aureus 5/5 2/2 1/2 1/2 Corynebacterium striatum (TIt et 7 Pseudomonas aeruginosa 5/5 2/2 2/2 2/2 PAx) ; Proteus mirabilis et Streptococcus constellatus (PAx) 9 Cutibacterium acnes 5/5 2/2 2/2 2/2 10 Staphylococcus aureus 4/4 2/2 2/2 2/2 13 Cutibacterium acnes 2/5 0/2 0/2 0/2 1 contaminant en TIt et 1 en PAx 15 Cutibacterium acnes 5/5 2/2 2/2 2/2

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RESULTATS ▪ Pour les 5 infections polymicrobiennes (16 espèces bactériennes en SC) : 14 (87,5%) détectées en flacons UTx, 11 (69%) en PAx et 12 (75%) en TIt Pvts SC UltraTurrax Patient Microorganisme TISSUTainer ProbeAx Espèces en plus dans l’étude globaux SC 1 Escherichia coli 5/7 2/2 2/2 2/2 1 Staphylococcus aureus 1/7 0/2 0/2 0/2 6 Enterobacter cloacae 5/5 2/2 2/2 2/2 6 Enterococcus faecium 5/5 2/2 2/2 1/2 8 Pasteurella canis 2/3 1/2 2/2 2/2 Neisseria spp en plus 8 Fusobacterium spp 2/3 2/2 2/2 2/2 avec PAx et TIt 8 Parvimonas micra 1/3 0/2 0/2 0/2 11 Proteus mirabilis 5/5 2/2 2/2 2/2 1 contaminant en PAx 11 Staphylococcus aureus 2/6 2/2 0/2 0/2 12 Escherichia coli 5/5 2/2 2/2 2/2 12 Staphylococcus aureus 5/5 2/2 2/2 2/2 Staphylococcus epidermidis 12 Enterococcus casseliflavus 4/5 2/2 2/2 2/2 en plus avec PAx et TIt 12 Acinetobacter nosocomialis 5/5 2/2 1/2 2/2 1 contaminant en PAx 12 Lysinibacillus fusiformis 2/5 1/2 0/2 0/2 12 Bacillus thuringiensis 5/5 2/2 2/2 2/2 12 Streptococcus mitis-oralis 4/5 1/2 2/2 0/2

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RESULTATS - SYNTHESE Résultats globaux SC Résultats pour 2 UTx Résultats pour 2 TIt Résultats pour 2 PAx (3 à 7 UTx) 3 patients avec stériles stériles stériles prélèvements stériles - 6 détectées par ≥ 1 des - 6 détectées par ≥ 1 des - 6 détectées par ≥ 1 des 7 IOA monomicrobiennes prélèvements inclus prélèvements inclus prélèvements inclus - 1 non détectée - 1 non détectée - 1 non détectée 5 IOA polymicrobiennes 5/5 détectées 5/5 détectées 5/5 détectées (16 espèces) (14 espèces) (12 espèces) (11 espèces) Espèces additionnelles : Espèces additionnelles : - contaminations : 3 - contaminations : 2 (staphylocoques non-aureus) (C. acnes, Kocuria) - pathogènes : 5 - pathogènes : 3 (C. striatum, Neisseria spp, (C. striatum, Neisseria spp, P. mirabilis, S. epidermidis, S. epidermidis) S. constellatus) → Au final, les résultats des nouveaux flacons étaient strictement concordants ou avec plus d’espèces détectées que les UTx du SC dans 76,7% pour les PAx comme les TIt.

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RESULTATS ▪ La conservation préanalytique à +4°C jusqu’à 3 j des flacons PAx et TIt n’a pas empêché de détecter des espèces exigeantes (Pasteurella, Neisseria, anaérobies) ▪ Le nombre de colonies obtenues sur les milieux de culture n’était pas significativement différent malgré un volume de broyage différent selon les flacons (UTx : 2 mL ; PAx : 5 mL ; TIt : 10 mL) Catégorisation semi-quantitative : > 50 UFC, 26-50, 11-25, 6-10, 1-5, uniquement bouillon

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DISCUSSION-CONCLUSION ▪ Etude prospective, prélèvements introduits dans les nouveaux poudriers dès le bloc ▪ Faible nombre de patients -> études prospectives plus larges nécessaires ▪ Montre des performances analytiques au moins équivalentes entre les nouveaux flacons TISSUtainer et ProbeAx Evo vs. Ultra-Turrax ▪ D’autres critères de praticabilité méritent d’être pris en compte : • sachet et support du flacon, • résistance aux chocs (pneumatique), • bruit (UTx > TIt > PAx), • encombrement (TIt > UTx et PAx), • nombre d’échantillons traités en même temps (TIt > Utx et PAx) • ou volume de broyat disponible (TIt > PAx > UTx)

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REMERCIEMENTS ▪ Aux techniciens et biologistes du service de bactériologie de l’Institut des Agents Infectieux, Hospices Civils de Lyon Cécile EYMARD Olivier DAUWALDER Marine JAWHAR Camille KOLENDA ▪ Aux chirurgiens orthopédiques ayant inclus les patients Pr Cécile BATAILLER Dr Christophe GAILLARD