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Performances de trois flacons prêts à l’emploi pour
le broyage des prélèvements orthopédiques
Olivier Dauwalder1, Camille Kolenda1, Cécile Eymard1, Marine Jawhar1, Cécile Batailler2, Christophe
Gaillard2, Frédéric Laurent1, Céline Dupieux1
1 Bactériologie, Hospices Civils de Lyon, France
2 Chirurgie orthopédique, Hospices Civils de Lyon, France
Céline DUPIEUX
Service de Bactériologie - Institut des Agents Infectieux - Hôpital de la Croix Rousse
Centre de Référence des Infections Ostéo-Articulaires Complexes Rhône-Alpes
celine.dupieux@chu-lyon.fr
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INTRODUCTION
▪ Diagnostic des IOA par culture essentiel (antibiogramme)
▪ Broyage des prélèvements solides nécessaire avant ensemencement
▪ Objectif : optimiser la sensibilité / limiter les contaminations
▪ Moyen : supports de prélèvements permettant un broyage directement sans manipulation du
prélèvement
▪ OBJECTIF = comparer les performances analytiques de 2 nouveaux flacons prêts à l’emploi
• ProbeAx Evolution (PAx ; Axonlab A.G.)
• TISSUtainer (TIt ; Diagante) au flacon Ultra-Turrax® UTX-001 (UTx ; Labelians)
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SUPPORTS EVALUES
Ultra-Turrax® UTX-001 TISSUtainer ProbeAx Evolution
(UTx ; Labelians) (TIt ; Diagante) (PAx ; Axonlab)
Milieu de broyage Eau stérile qualité BM Milieu de conservation qualité Solution saline qualité BM
2 mL BM, 10 mL 5 mL
Méthode de broyage Bloc céramique + râpe
Billes acier x10 Billes acier x4
métallique Inox
Broyeur Ultra-Turrax® (IKA) MM400 (Retsch®) SpinAX (AxonLab A.G.)
Temps de broyage 1 min / 1 échantillon 2,5 min / 2-8 échantillons 1 min / 1 échantillon
Marquage CE (ancienne réglementation DM-DIV classe A stérile, DM-DIV classe A stérile,
98/79/CE) CE IVDR CE IVDR
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MATERIEL ET METHODES
▪ Etude prospective
▪ 2 blocs de chirurgie orthopédique des Hospices Civils de Lyon (HCL)
▪ 15 patients à forte suspicion d’IOA
• Prélèvements diagnostiques réalisés pour le soin courant (SC) en flacons Ultra-Turrax
• Parmi ces prélèvements, 2 réalisés en triple et introduits au bloc dans les 3 flacons
• Au laboratoire :
- Flacons Ultra-Turrax traités selon le flux du SC
- Flacons ProbeAx et TISSUtainer traités pour l’étude selon disponibilité des techniciens
référents (conservation préanalytique à +4°C en cas d’attente ; 1-3 jours)
- Broyats analysés selon les recommandations du REMIC (géloses COS, PVX, SCS et
bouillon Schaedler, incubés 14 j)
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INTERPRETATION DES RESULTATS
▪ Lecture des cultures : quantification / identification des colonies obtenues
▪ Définitions :
• Espèce responsable d'IOA : si retrouvée ≥ 2 fois sur pvts du SC ou de l’étude pour les bactéries
potentiellement contaminantes et ≥ 1 fois pour les bactéries non classiquement contaminantes
• Contamination si 1 seul pvt positif avec une espèce peu virulente des flores ou de
l’environnement
▪ Comparaison :
• Nombre d’espèces bactériennes retrouvées avec chaque poudrier
• Référence : résultats globaux des pvts en Ultra-Turrax du SC
• Pour chaque espèce retrouvée par ≥ 2 types de poudriers, comparaison semi-quantitative du
nombre de colonies obtenues (catégories > 50 UFC, 26-50, 11-25, 6-10, 1-5, uniquement bouillon)
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RESULTATS
▪ Les 3 à 7 flacons UTx réalisés pour le SC des 15 patients ont retrouvé
• 7 infections monomicrobiennes
• 5 infections polymicrobiennes
• aucun microorganisme pour 3 patients
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RESULTATS
▪ Pour les 3 patients avec prélèvements stériles
Patient Ultra-Turrax SC TISSUTainer ProbeAx Evo
2 2/2 stériles 2/2 stériles 2/2 stériles
5 2/2 stériles 2/2 stériles 2/2 stériles
1/2 stérile
14 2/2 stériles 2/2 stériles
et 1/2 contaminé *
* 1 colonie Cutibacterium acnes sur SCS14
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RESULTATS
▪ Pour les 7 infections monomicrobiennes : détectées dans 6 cas sur 7
(86%) dans au moins 1 des 2 prélèvements de l’étude, ceci par tous
les flacons comparés (UTx, PAx, TIt)
Pvts SC Ultra-Turrax Espèces en plus dans
Patient Microorganisme TISSUTainer ProbeAx
globaux SC l’étude
3 Finegoldia magna 4/5 1/2 1/2 2/2
4 Staphylococcus aureus 5/5 2/2 1/2 1/2
Corynebacterium striatum (TIt et
7 Pseudomonas aeruginosa 5/5 2/2 2/2 2/2 PAx) ; Proteus mirabilis et
Streptococcus constellatus (PAx)
9 Cutibacterium acnes 5/5 2/2 2/2 2/2
10 Staphylococcus aureus 4/4 2/2 2/2 2/2
13 Cutibacterium acnes 2/5 0/2 0/2 0/2 1 contaminant en TIt et 1 en PAx
15 Cutibacterium acnes 5/5 2/2 2/2 2/2
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RESULTATS
▪ Pour les 5 infections polymicrobiennes (16 espèces bactériennes en SC) :
14 (87,5%) détectées en flacons UTx, 11 (69%) en PAx et 12 (75%) en TIt
Pvts SC UltraTurrax
Patient Microorganisme TISSUTainer ProbeAx Espèces en plus dans l’étude
globaux SC
1 Escherichia coli 5/7 2/2 2/2 2/2
1 Staphylococcus aureus 1/7 0/2 0/2 0/2
6 Enterobacter cloacae 5/5 2/2 2/2 2/2
6 Enterococcus faecium 5/5 2/2 2/2 1/2
8 Pasteurella canis 2/3 1/2 2/2 2/2
Neisseria spp en plus
8 Fusobacterium spp 2/3 2/2 2/2 2/2
avec PAx et TIt
8 Parvimonas micra 1/3 0/2 0/2 0/2
11 Proteus mirabilis 5/5 2/2 2/2 2/2
1 contaminant en PAx
11 Staphylococcus aureus 2/6 2/2 0/2 0/2
12 Escherichia coli 5/5 2/2 2/2 2/2
12 Staphylococcus aureus 5/5 2/2 2/2 2/2
Staphylococcus epidermidis
12 Enterococcus casseliflavus 4/5 2/2 2/2 2/2
en plus avec PAx et TIt
12 Acinetobacter nosocomialis 5/5 2/2 1/2 2/2
1 contaminant en PAx
12 Lysinibacillus fusiformis 2/5 1/2 0/2 0/2
12 Bacillus thuringiensis 5/5 2/2 2/2 2/2
12 Streptococcus mitis-oralis 4/5 1/2 2/2 0/2
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RESULTATS - SYNTHESE
Résultats globaux SC
Résultats pour 2 UTx Résultats pour 2 TIt Résultats pour 2 PAx
(3 à 7 UTx)
3 patients avec
stériles stériles stériles
prélèvements stériles
- 6 détectées par ≥ 1 des - 6 détectées par ≥ 1 des - 6 détectées par ≥ 1 des
7 IOA monomicrobiennes prélèvements inclus prélèvements inclus prélèvements inclus
- 1 non détectée - 1 non détectée - 1 non détectée
5 IOA polymicrobiennes 5/5 détectées 5/5 détectées 5/5 détectées
(16 espèces) (14 espèces) (12 espèces) (11 espèces)
Espèces additionnelles :
Espèces additionnelles :
- contaminations : 3
- contaminations : 2
(staphylocoques non-aureus)
(C. acnes, Kocuria)
- pathogènes : 5
- pathogènes : 3
(C. striatum, Neisseria spp,
(C. striatum, Neisseria spp,
P. mirabilis, S. epidermidis,
S. epidermidis)
S. constellatus)
→ Au final, les résultats des nouveaux flacons étaient strictement concordants ou avec plus
d’espèces détectées que les UTx du SC dans 76,7% pour les PAx comme les TIt.
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RESULTATS
▪ La conservation préanalytique à +4°C jusqu’à 3 j
des flacons PAx et TIt n’a pas empêché de détecter
des espèces exigeantes (Pasteurella, Neisseria,
anaérobies)
▪ Le nombre de colonies obtenues sur les milieux de
culture n’était pas significativement différent
malgré un volume de broyage différent selon les
flacons (UTx : 2 mL ; PAx : 5 mL ; TIt : 10 mL)
Catégorisation semi-quantitative : > 50 UFC,
26-50, 11-25, 6-10, 1-5, uniquement bouillon
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DISCUSSION-CONCLUSION
▪ Etude prospective, prélèvements introduits dans les nouveaux poudriers dès le bloc
▪ Faible nombre de patients -> études prospectives plus larges nécessaires
▪ Montre des performances analytiques au moins équivalentes entre les nouveaux flacons
TISSUtainer et ProbeAx Evo vs. Ultra-Turrax
▪ D’autres critères de praticabilité méritent d’être pris en compte :
• sachet et support du flacon,
• résistance aux chocs (pneumatique),
• bruit (UTx > TIt > PAx),
• encombrement (TIt > UTx et PAx),
• nombre d’échantillons traités en même temps (TIt > Utx et PAx)
• ou volume de broyat disponible (TIt > PAx > UTx)
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REMERCIEMENTS
▪ Aux techniciens et biologistes du service de bactériologie
de l’Institut des Agents Infectieux, Hospices Civils de Lyon
Cécile EYMARD Olivier DAUWALDER
Marine JAWHAR Camille KOLENDA
▪ Aux chirurgiens orthopédiques ayant inclus les patients
Pr Cécile BATAILLER
Dr Christophe GAILLARD